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智立中特(武漢)生物科技有限公司
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質粒載體網兔胚胎成纖維細胞RPEF
質粒載體網兔胚胎成纖維細胞RPEF
2022年10月27日
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1 件起批
區域:
湖北 武漢 東西湖區
關鍵詞:
智立中特生物 質粒載體網
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詳細介紹
細胞名稱:人胚肺成纖維細胞CCC-HPF-1
產品規格:T25培養瓶x1;1.5ml凍存管x2
細胞數量:1x10^6;1x10^6
保存溫度:37℃;-198℃
運輸方式:常溫保溫運輸;干冰運輸
安全等級:1
用途限制:僅供科研3類
培養體系:DMEM高糖培養基+10%FBS+1%雙抗
培養溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:兔胚胎成纖維細胞RPEF,成纖維樣,貼壁培養,波形蛋白、纖維連接蛋白陽性。消化時間建議5分鐘,請各位學者注意。
注釋:倍增時間43h
STR信息:/
參考文獻:/
驗收細胞注意事項
1、收到兔胚胎成纖維細胞RPEF細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。
2、收到兔胚胎成纖維細胞RPEF細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到兔胚胎成纖維細胞RPEF細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右,血清濃度還是在10%。
4、收到兔胚胎成纖維細胞RPEF細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下5-10ML培養基繼續培養:超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
6、24小時后,兔胚胎成纖維細胞RPEF形態已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之**脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37℃,5%CO2培養。
特別提醒:原瓶中培養基不宜繼續使用,請更換新鮮培養基培養。
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智立中特(武漢)生物科技有限公司
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1944067858@qq.com
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