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智立中特(武漢)生物科技有限公司
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智立中特生物人卵巢癌細胞OVCA433
智立中特生物人卵巢癌細胞OVCA433
2022年10月25日
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價格:
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起批量:
1 件起批
區域:
湖北 武漢 東西湖區
關鍵詞:
智立中特生物 質粒載體網
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肖** 女士 (經理)
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詳細介紹
細胞名稱:人卵巢癌細胞OVCA433
產品規格:T25培養瓶x1;1.5ml凍存管x2
細胞數量:1x10^6;1x10^6
保存溫度:37℃;-198℃
運輸方式:常溫保溫運輸;干冰運輸
安全等級:1
用途限制:僅供科研2類
培養體系:DMEM高糖培養基+10%FBS+1%三抗
培養溫度:37℃
二氧化碳濃度:5%
簡介:人卵巢癌細胞OVCA433取自女性供體,貼壁培養。
一、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱**夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)半貼細胞和貼壁不牢(懸浮)細胞:T25瓶置于37℃培養箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用**培養基重懸后打回到原培養瓶中繼續培養,若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養基中懸浮的細胞離心后回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的。
二.細胞處理:
1)凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL**培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,**培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml**培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。**天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養。
該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,傳代可以參考以下方法:
1.收集:將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3.將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的**培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
聯系方式
智立中特(武漢)生物科技有限公司
聯系人:
肖** 女士 (經理)
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郵箱:
1944067858@qq.com
聯系地址:
湖北省武漢市東湖高新開發區軟件新城健康智谷D2棟5樓
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